SRSF6与结直肠癌发生相关

SRSF6是富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子，在结直肠癌症组织的达量显著高于正常组织，高表达的SRSF6与不良预后相关。细胞实验和动物实验证明SRSF6能促进结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭，以及诱发肿瘤和肺转移。

SRSF6调控ZO-1的可变剪接

mRNA-seq：使用无处理的结直肠癌细胞系SW620作为对照，敲除SRSF6的SW620细胞作为处理，进行RNA测序，分析可变剪接事件。发现差异可变剪接事件1158个，其中PSI（Percent spliced in，表示可变剪接发生的程度）在719个可变剪接事件中上调，在439个可变剪接事件中下调。其中698个（约60%）可变剪接事件为盒式外显子（CA），包括外显子跳跃和保留，SRSF6对外显子的跳跃和保留均有调控作用。这些可变剪接事件与细胞粘附分子结合途径、细胞骨架蛋白结合相关。

RIP-seq：寻找SRSF6结合的转录本，和motif：UGGAG、UGGAC。

RIP-seq和RNA-seq关联分析：关联分析SRSF6调控的可变剪接体和SRSF6结合的转录本，筛选到ZO-1（表达重要的细胞粘附分子）的23号外显子保留的可变剪接体在SRSF6敲除后显著增加，且23号外显子含有motif序列UGGAC，RIP实验验证SRSF6与该motif特异性结合，motif的第一个碱基U或第三个碱基G突变后，不能被SRSF6结合。

作者构建了EGFP报告基因系统，23号外显子跳读可保留EGFP的开放阅读框（ORF），23号外显子保留则破坏ORF，EGFP不能顺利表达。结果证明SRSF6敲除显著降低了EGFP表达，说明SRSF6敲除导致ZO-1的23号外显子保留。

ZO-1的异常可变剪接促进结直肠癌发展

作者（使用si-1和si-2）敲除结直肠癌细胞中含有23号外显子的可变剪接体ZO-1 E23+，以及同时敲除两种ZO-1可变剪接体（si-1732和si-3026）。结果发现敲除SRSF6的结直肠癌细胞迁移和侵袭能力受损，若同时敲除ZO-1 E23+可变剪接体，可以恢复细胞的迁移和侵袭能力。

氧化偶氮甲烷（AOM）处理建立的结直肠癌小鼠模型中，SRSF6表达上调，同时发生ZO-1的23号外显子跳跃，不含23号外显子ZO-1可变剪接体（ZO-1 E23-）上调，而含23号外显子的ZO-1 E23+下调，肿瘤中的23号外显子的PSI（Percent Spliced In）下调（PSI表示可变剪接发生的程度）。说明SRSF6促进ZO-1的23号外显子跳跃，促进结直肠癌发展。

SRSF6与RNA结合的关键结构域RRM2

作者还发现SRSF6通过其结构域RRM2识别并结合motif UGGAC发挥作用，并筛选到药物indacaterol（茚达特罗），能够与SRSF6结合、靶向SRSF6调控可变剪接，对多种结直肠癌细胞具有杀伤作用，从而抑制结直肠癌恶化，今后有望用于结直肠癌的治疗。

参考文献

Wan L, Yu W, Shen E, et al. SRSF6-regulated alternative splicing that promotes tumour progression offers a therapy target for colorectal cancer[J]. Gut, 2017:gutjnl-2017-314983.