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Chip-seq:DNA结合蛋白功能的研究工具
人类基因组的20000个蛋白编码基因中,约有2000个具备DNA结合的能力。这些DNA结合蛋白包括染色体组装的组蛋白、DNA复制相关结构蛋白、核酸酶和DNA聚合酶,转录相关转录因子和RNA聚合酶等。其中转录因子的数量最多,约有1500个。
转录因子蛋白通常具有DNA结合结构域和功能结构域。根据DNA结合结构域的特征,转录因子可以被划分成数十个家族。通过识别增强子或启动子的相应序列结合到DNA上之后,转录因子可以通过多种方式行使对转录的调控功能:
- 部分转录因子结合到转录起始位点附近的DNA启动子序列,并帮助形成转录起始复合物;
- 部分转录因子结合调节序列,例如增强子序列,刺激或抑制相关基因的转录;
- 部分转录因子(先驱转录因子),则可以招募修饰酶,调控基因的组蛋白修饰和DNA甲基化状态,改变染色质构象从而调控基因的转录;
Chip-seq就是研究这些DNA结合蛋白功能的重要工具。Chip-seq测序(CHromatin ImmunoPrecipitation and high-throughput SEQuencing)是将染色质免疫共沉淀和高通量测序相结合的技术。通过特异性抗体,将待研究的目标DNA结合蛋白-DNA形成的复合物沉淀下来,从而获取该蛋白结合的DNA。通过对DNA进行高通量测序,即可获得该蛋白在染色体上结合的情况。
Chip-seq的流程包括细胞/组织交联、细胞核提取、染色质片段化、免疫共沉淀、DNA回收、文库构建、高通量测序和生信分析等一系列步骤,如下图所示:
您只需要:
1、提供目标蛋白和样品信息,评估可行性;
2、提供样品和抗体,剩下的我们来做;
3、收到实验和分析报告,使用数据;
我们是专业的Chip-seq技术服务供应商:
- 严格的质控体系:我们的服务提供三重质检,保证结果的可靠性;
- 领先的技术:我们有近千次IP锤炼出来的IP体系;
- 全物种覆盖:我们有最先进的细胞核分离纯化技术,再罕见的物种、再复杂的组织类型,都不是问题;
- 自动化IP工作站:我们建设了国内唯一的自动化IP工作站,可以在1天时间内完成32个样品的平行IP实验,缩短项目周期、提高结果稳定性;
- 项目经验丰富:我们累计提供了几十种组蛋白、转录因子,50多个物种的上千次Chip-seq服务;
一个好的Chip-seq实验,需要具备以下素质:
1)良好的免疫共沉淀效果:足够的特异性和足够的IP效率;
2)分析结果应该符合目的蛋白已知的结合模式。
转录因子
Chromatin Remodelling Protein
Chromatin Remodelling Protein
转录因子ChIP测序
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